【高中生物】《生物技术及工程》第3章 基因工程 复习与提高

第3章 基因工程 

复习与提高

1．(1)应选择用相同的限制酶或切割能产生相同末端的限制酶切割质粒和含有目的基因的DNA片段。并且注意限制酶的切割位点不能位于目的基因的内部，以防破坏目的基因，限制酶也不能破坏质粒的启动子、终止子、标记基因、复制原点等结构。（P98）

(2) 加入 DNA连接酶。（P98）

(3) 该质粒便于进行双重筛选。标记基因 AmpR基因可用于检测质粒是否导入了大肠杆菌，一般只有导入了质粒的大肠杆菌才能在添加了青霉素的培养基上生长。而由于 LacZ基因的效应，这些生长的菌落可能出现两种颜色：含有空质粒（没有连接目的基因的质粒）的大肠杆菌菌落呈蓝色；含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色。（P98）
(4) 含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色。因为目的基因的插入破坏了 LacZ基因的结构，使其不能正常表达，形成 β-半乳糖苷酶，底物 X-gal也就不会被分解。（P98）

2．(1)逆转录病毒是载体，能将外源基因 Oct3/4、Sox2、c-Myc 和 KIf4 送入小鼠成纤维细胞。（P98） (2)可以设置对照组。将转入外源基因和没有转人外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，并确保其他培养条件相同。如果只有转入外源基因的细胞转化成了 iPS 细胞，就可以证明 iPS 细胞的产生不是由于培养基的作用。（P98）
(3) 可以依次去掉 1个基因，将其他 3个基因转入小鼠成纤维细胞中，然后通过与转入 4个基因的小鼠成纤维细胞的诱导情况进行比较，来推测缺失的那个基因对诱导 iPS细胞的影响，进而判断每个基因作用的相对大小。（其他合理答案均可）（P98）

(4) 不会引起免疫排斥反应，因为在诱导转化的过程中细胞的遗传物质没有发生变化，理论上产生的还是“自体”细胞。iPS细胞拥有分化为各种细胞的潜能，因此存在分化成肿瘤细胞的风险。（P98）

3．(1)从亲缘关系的远近来看，固氮相关基因可能更容易在水稻根系微生物中稳定存在和表达，进而使其具有固氮的能力。（其他合理答案均可）（P98）

(2)提示：此题不要求有唯一的答案，学生可从便捷性、安全性、经济性等角度进行分析，言之成理即可。例如，从便捷性角度认为能固氮的水稻新品种更值得推广；或从转基因安全性角度认为能固氮的水稻根系微生物更值得推广等。（P98）